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microRNA 3 UTR 靶标克隆

  可提供含有荧光素酶报告基因的哺乳动物载体的人、小鼠、大鼠miRNA 3' UTR靶标克隆。您可选择双荧光素酶或单荧光素酶载体在细胞裂解或不破坏靶标细胞的状态下进行实验。

  miRNA 3' UTR靶标克隆可用于对预测目标的miRNA靶标鉴定和功能确证,或关于miRNA对靶标基因调节作用的研究。

  3' UTR序列来源于基因序列的公共数据库并插入到各自载体系统的firefly或Gaussia荧光素酶报告基因下游??寺〔捎肧V40启动子,在哺乳动物细胞中转录生成包含有firefly或 Gaussia荧光素酶和3' UTR靶标序列的嵌合mRNA。因此,可通过对firefly 或 Gaussia荧光素酶的功能分析来研究mRNA-miRNA靶标的相互作用。


图1. miRNA 3' UTR靶标克隆载体骨架

  优势

 1.覆盖面广
覆盖人类(23000)、小鼠(19000)和大鼠(8000)基因


  2.简单的系统设计

3' UTR靶标序列插入在firefly或Gaussia荧光素酶下游,当miRNA复合体与3' UTR靶标特异结合时,荧光素酶的表达受到抑制。


  3.方便的双报告载体

载体中的两个报告基因,一个可用于检测调节作用,另一个可用作内参和信号校对。
排除了同时转染两个不同报告基因质粒的需要。


  4.可使用配套的试剂盒进行简单定量

可使用配套的试剂盒对细胞裂解物(firefly荧光素酶,非分泌型)或细胞上清(Gaussia荧光素酶,分泌型)中的荧光素酶活性进行简单定量。


  5.活细胞分析(pEZX-MT05 vector)

分泌型Gaussia荧光素酶,无需细胞裂解。


  6.节省时间和样本,减少突变,简化试验流程。

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